(一)干熱滅菌
【原理】
高溫對細菌有明顯的致死作用,主要機理是凝固菌體蛋白質(zhì),也可能與細菌DNA單螺旋斷裂、細菌膜功能受損及菌體內電解質(zhì)濃縮有關(guān)。干烤箱為常用的干熱
滅菌器,其殺菌作用是通過(guò)脫水干燥和大分子變性完成的。
【構造】
干烤箱是中間夾著(zhù)石棉的雙層金屬制成的方形或長(cháng)方形箱,箱底裝有熱源,箱內有數層金屬架,并附有溫度計和自動(dòng)溫度調節器等裝置。把待滅菌的物件均勻地放入恒溫干燥箱,加熱**160℃~170℃維持2小時(shí)即可達滅菌目的。
【使用方法及注意事項】
1.將包扎好的待滅物品(培養皿、吸管器等)放于箱內,注意不要擺得太擠,以免妨礙氣流流通。
2.關(guān)門(mén),插上電源插頭(常為220伏),撥動(dòng)開(kāi)關(guān),旋動(dòng)恒溫調節器,**紅燈亮。
3.待溫度上升160℃~170℃時(shí),借恒溫調節器的自動(dòng)控制,保持此溫度2小時(shí)。
4.滅菌后停止加熱,待溫度下降**40℃以下方可開(kāi)門(mén)取物,在這之前切勿自行打開(kāi)箱門(mén),否則其內物品(如玻璃器皿等)會(huì )因溫度驟然下降而爆裂。
【應用】
干熱滅菌主要用于要求干燥的、耐高溫的物品滅菌,如玻璃器材、瓷器、凡士林、液體石蠟、藥粉等的滅菌。一般不耐高溫的、含有水份的物質(zhì),不能用這種方法滅菌。
(二)濕熱滅菌
【原理】
高溫對細菌有明顯的致死作用,主要機理是凝固菌體蛋白質(zhì),也可能與細菌DNA單螺旋斷裂、細菌膜功能受損及菌體內電解質(zhì)濃縮有關(guān)。濕熱滅菌所需溫度較低,時(shí)間較短(表3-2)。特別是高壓蒸氣滅菌,因增加壓力而提高溫度,滅菌效果**佳。其主要優(yōu)點(diǎn)是:①溫度較高,滅菌所需時(shí)間較短;②蒸氣穿透力強;③蒸氣冷凝時(shí)釋放汽化熱,能迅速提高物品的溫度;④物品不過(guò)分潮濕。
表3-2 熱力消毒滅菌法比較
方法 溫度(℃) 時(shí)間(min)
滅菌器 適用物品
焚燒 >500 瞬時(shí) 廢棄物品、動(dòng)物尸體滅菌
干烤 160~170 120 干熱
滅菌器(干烤箱) 玻璃器材、瓷器等滅菌
巴氏消毒法 61.1~62.8
71.7 30
15-30s 牛奶、酒類(lèi)等消毒
煮沸消毒法 100 5 食具、刀剪、注射器等消毒
流通蒸氣消毒法 100 15~30 Arnold流通蒸氣滅菌器 食具等消毒
間歇滅菌法 100 30 流通蒸氣滅菌器(重復3次) 不耐高溫的含糖、牛奶等培養基
高壓蒸氣滅菌法 121 15~30 高壓蒸氣滅菌器 耐高溫、高壓及不怕潮濕的物品
高壓蒸氣滅菌器是目前應用**廣泛、滅菌效果**好的滅菌器具,其種類(lèi)有手提式、直立式、橫臥式等。它們的構造及滅菌原理基本相同。高壓蒸氣滅菌方法的原理是水在大氣中100℃左右沸騰,水蒸氣壓力增加,沸騰時(shí)溫度將隨之增加,因此,在密閉的高壓蒸氣滅菌器內,當壓力表指示蒸氣壓力增加到15磅(1.05kg/cm)時(shí),溫度則相當于121.3℃,在這種溫度下20min即可完全殺死細菌的繁殖體及芽胞。
【構造】
高壓蒸汽滅菌器有各種形式及規格。下面以常用的高壓
蒸汽滅菌鍋為例進(jìn)行介紹。高壓
蒸汽滅菌鍋是一個(gè)密閉的耐高溫和耐高壓的雙層金屬圓筒,兩層之間盛水。
①外鍋:供裝水產(chǎn)生蒸汽之用。堅厚,其上方或前方有金屬厚蓋,蓋有螺栓,借以緊閉蓋門(mén),使蒸汽不能外溢。加熱后,滅菌器內蒸汽壓力升高,溫度也隨之升高,壓力越大,溫度越高。
外鍋壁上還裝有排氣閥、溫度計、壓力表及安全閥。排氣閥用于排出空氣;壓力表:以表示鍋內壓力及溫度(公制壓力單位為公斤/cm2、英制壓力單位磅/英寸2、溫度單位℃);安全閥又稱(chēng)保險閥,利用可調彈簧控制活塞,超過(guò)定額壓力即自行放汽減壓,以保證在滅菌工作中的安全。
②內鍋:為放置滅菌物的空間。
【使用方法及注意事項】
1.使用前的準備:滅菌器內清洗干凈,檢查進(jìn)氣閥及排氣閥是否靈活有效,并加入適量水。
2.裝放滅菌物:將待滅菌的物品放入滅菌器內,注意不要放得太擠,以免影響蒸汽的流通和滅菌效果。然后加蓋旋緊螺旋,密封。
3.預熱及排氣:加熱升溫使水沸騰,并由小**大打開(kāi)排氣管(排氣閥),排除冷空氣,繼續加熱升溫,再關(guān)閉排氣管(閥)。
4.升壓保溫:讓溫度隨蒸汽壓力增高而上升待壓力逐漸上升,待蒸汽壓力升**所需壓力(一般為103.43kPa,溫度則相當于121.3℃)時(shí),控制熱源,維持所需時(shí)間,持續15~20min即可達到滅菌目的。
5.降壓開(kāi)蓋取物:保壓到規定時(shí)間之后,就停止加熱,緩緩排氣,待其壓力下降**零時(shí),方可開(kāi)蓋取物。
6.注意事項
⑴此法滅菌是否徹底的一個(gè)關(guān)鍵是壓力上升之前,必須先把蒸汽鍋內的冷空氣完全驅盡,否則,即使壓力表已指到103.43kPa,而鍋內溫度則只有100℃,這樣芽孢則不能被殺死,造成滅菌不徹底,所以必須進(jìn)行排氣。
⑵降壓一般通過(guò)自行冷卻。如果時(shí)間來(lái)不及,可以稍開(kāi)排氣閥降壓,但排氣閥不能開(kāi)得太大,排氣不能過(guò)急,否則滅菌器內驟然降壓,滅菌物內的液體會(huì )突然沸騰,將棉塞沖濕,甚**外流。另外,降壓時(shí)壓力表上讀數雖已降**“0”時(shí),滅菌物內溫度有時(shí)還會(huì )在100℃以上,如果開(kāi)鍋太快還有沸騰的可能,所以**好在降壓后再稍停一會(huì ),滅菌物溫度下降后再出鍋較妥當。滅菌物滅菌后仍處于高溫時(shí),容器內呈真空狀,降溫過(guò)程中外部空氣要重新進(jìn)入容器。一般叫“回氣”,降溫過(guò)快,回氣就急,如棉塞不嚴密,空氣中雜菌就會(huì )重新進(jìn)入滅菌物使其污染,這往往造成高壓蒸汽滅菌的失敗。因而降壓開(kāi)蓋取物不宜過(guò)急。#p#分頁(yè)標題#e#
【應用】
高壓蒸汽滅菌可用于耐高溫、高壓及不怕潮濕的物品,如普通培養基、生理鹽水、紗布、敷料、手術(shù)器械、玻璃器材、隔離衣等的滅菌。