滅菌是指用物理或化學(xué)方法將所有致病和非致病的微生物全部殺滅。滅菌法是指殺滅或除去所有微生物的繁殖體和芽孢或孢子的技術(shù)。微生物包括細菌、真菌、病毒等。微生物的種類(lèi)不同、則滅菌的方法不同，滅菌效果也不同。細菌的芽孢具有較強的抗熱能力，因此滅菌效果，常以殺滅芽孢為準。消毒是指殺滅物體上的微生物的繁殖體，不能保證殺死芽孢或孢子。滅菌與消毒在藥品生產(chǎn)過(guò)程中是極為重要的，它是藥品生產(chǎn)過(guò)程中一項重要的操作，也是保證藥品質(zhì)量的重要措施之一。
滅菌涉及到廠(chǎng)房、設備、容器、潔具、工作服裝、原輔材料、成品、包裝材料、儀器等等的滅菌。無(wú)菌藥品特別是注射液、供角膜創(chuàng )傷或手術(shù)用滴眼劑等無(wú)菌制劑是直接進(jìn)入人體血液循環(huán)系統而產(chǎn)生療效的藥品，所以對其質(zhì)量有特殊要求，它必須符合藥典無(wú)菌檢查的要求，為此，在生產(chǎn)過(guò)程中，要努力消除微生物的污染，殺滅藥品中的微生物，這就是滅菌要達到的目的。
滅菌的方法基本上分為二大類(lèi)：物理方法（干熱滅菌、濕熱滅菌、射線(xiàn)滅菌、濾過(guò)滅菌）和化學(xué)方法（氣體滅菌、藥液滅菌）。
下面將分別介紹幾種常用的滅菌方法。
**節 干熱滅菌法及其設備
1. 干熱滅菌
干熱可用于能耐受較高溫度，卻不宜被蒸汽穿透，或者易被濕熱破壞的物品的滅菌。同時(shí)干熱也是制藥工業(yè)中用于除熱原的方法之一。由于在相同的溫度下，干熱對微生物的殺滅效果遠低于飽和蒸汽，故干熱滅菌需要較高的溫度或較長(cháng)的滅菌時(shí)間。評價(jià)干熱法滅菌的相對能力時(shí)，一般可采用相似于F
0值的致死率單位和生物指示劑。F
0值與濕熱滅菌系統驗證中使用的F
0值是將時(shí)間與濕度條件的改變折算成170℃時(shí)的相當時(shí)間，同時(shí)設定Z值為20℃即F
H值。BP1993年版規定，僅以滅菌為**終日的干熱滅菌系統，必須保證其**小的F
H值大于170℃60min。對于采用干熱存活概率法滅菌的系統，驗證結果應能證明其滅菌過(guò)程保證對耐熱微生物的殺滅效果達到認可的低存活概率，一般未被殺滅的概率為10
－6，即滅菌物品經(jīng)過(guò)滅菌后殘存微生物污染的可能性為百萬(wàn)分之一。對于采用干熱過(guò)度殺滅法滅菌系統的驗證結果，應證明其滅菌過(guò)程保證對干熱呈高度耐受性的微生物產(chǎn)生大于12個(gè)log的遞減，取得低于10
－12的微生物存活概率，即滅菌物品經(jīng)過(guò)滅菌后殘存的微生物污染可能性低于百萬(wàn)分之一，同時(shí)在做過(guò)度殺滅法滅菌過(guò)程驗證時(shí)不需要做常規的帶菌量的估價(jià)。
2. 干熱滅菌的主要設備
3. 干熱滅菌的主要設備有干熱滅菌柜、隧道滅菌系統。干熱滅菌設備一般由下列幾個(gè)重要部分組成：
1. 加熱器―――它是干熱滅菌設備的主要組成部分，對滅菌效果的好壞影響極大。加熱器故障是造成干熱滅菌設備滅菌效果下降的主要原因之一，其主要表現為升溫速度下降；影響熱分布；產(chǎn)生塵埃物質(zhì)。而造成加熱器故障的原因，主要是加熱器的長(cháng)期使用或通過(guò)加熱器的空氣質(zhì)量較差所致。所以一般應在
滅菌器的加熱系統配置電流監測器，以及時(shí)發(fā)現其故障。
2. 高效過(guò)濾器―――在干熱滅菌設備中，進(jìn)風(fēng)應通過(guò)高效過(guò)濾器；除去內部空氣循環(huán)系統中產(chǎn)生的塵埃物質(zhì)需要高效過(guò)濾器；防止排風(fēng)倒流的污染也可裝高效過(guò)濾器。所以高效過(guò)濾器必須滿(mǎn)足干熱滅菌工藝用風(fēng)量的要求，并能承受相應的風(fēng)壓。
3. 緩沖板、風(fēng)閥、氣流調節器或空氣檔板―――緩沖板或空氣檔板用于控制干熱
滅菌器的空氣流量，多安裝于進(jìn)風(fēng)或排風(fēng)風(fēng)管或加熱器附近，用于正壓控制的氣流調節器可以安裝排風(fēng)系統中的防止倒流風(fēng)污染的高效過(guò)濾器附近，通過(guò)控制排風(fēng)量控制正壓，也可以用氣流調節器控制進(jìn)風(fēng)和排風(fēng)風(fēng)量以保持正壓。一般情況下，干熱
滅菌器腔室內的壓力略高于其相臨的非無(wú)菌區而略低于其相臨的無(wú)菌區。
4. 風(fēng)機―――對干熱滅菌器中的氣流循環(huán)影響很大，風(fēng)機的風(fēng)量應該可以測量，并可
調整，必要時(shí)可以要求供應商將此項要求增加到其設備標準中，因為風(fēng)機風(fēng)量的測量指示值，可以為設備使用過(guò)程中檢查風(fēng)機狀態(tài)提供依據。
5．傳送帶（僅適用于連續法）―――傳送帶的速度，在連續傳送干熱滅菌系統中是十分重要的滅菌效果影響因素。目前大多數干熱連續法滅菌系統中已設有傳送帶速度控制器，但較少有速度記錄裝置。由于傳送帶速度決定了物料經(jīng)過(guò)滅菌器時(shí)所接受的熱量，所以其速度記錄是證明滅菌器在控制狀態(tài)下運行的基本資料之一，生產(chǎn)工藝中亦有必要保存每次滅菌過(guò)程的傳送速度的記錄。同時(shí)干熱滅菌器的SOP，也應明確規定各種滅菌過(guò)程傳送帶的運行速度范圍，此運行速度范圍應是經(jīng)過(guò)驗證確定的。
6．運行連鎖控制系統―――干熱滅菌器中連鎖控制系統設有：門(mén)連鎖控制系統；壓力傳感器；溫度傳感、控制、停止傳送帶運行的連鎖控制裝置等，以保證在任何情況下出現溫度低于設計要求時(shí)防止滅菌物品在低于滅菌溫度的情況下通過(guò)滅菌器。
7. 溫度控制器及記錄儀―――在干熱滅菌系統中，溫度探測、傳感、控制、記錄系統
是整個(gè)滅菌過(guò)程控制的基礎，其控制系統必須能保證滅菌器腔室內滅菌溫度可以保持在設定的滅菌溫度范圍內，其記錄系統必須將溫度探測、傳感系統的溫度讀數準確無(wú)誤地記錄清楚。#p#分頁(yè)標題#e#
第二 節濕熱滅菌法及其設備
1. 濕熱滅菌法
是在飽和蒸汽或沸水或流通蒸汽中進(jìn)行滅菌的方法。由于蒸汽潛熱大，穿透力強，容易使蛋白質(zhì)變性或凝固，所以滅菌效率比干熱滅菌法高。這是注射劑生產(chǎn)中應用**廣泛的一種滅菌方法，它具有滅菌可靠，操作方便，易于控制和經(jīng)濟等優(yōu)點(diǎn)。
影響濕熱滅菌的因素有：
1. 細菌的種類(lèi)與數量：不同細菌，同一細菌的不同發(fā)育階段對熱的抵抗力有所不同。
細菌數越少，滅菌時(shí)間越短。
2. 藥物性質(zhì)與滅菌時(shí)間：一般來(lái)說(shuō)，滅菌溫度越高滅菌時(shí)間越短。但考慮到藥物的穩
定性，應在達到有效滅菌的前題下可適當降低滅菌溫度或縮短滅菌時(shí)間。
3. 蒸汽的性質(zhì)：蒸汽有飽和蒸汽，濕飽和蒸汽和過(guò)熱蒸汽。飽和蒸汽熱含量較高，熱穿透力較大，因此滅菌效力高。濕飽和蒸汽帶有水分，熱含量較低，穿透力差，滅菌效力較低。過(guò)熱蒸汽溫度高于飽和蒸汽，但穿透力差，滅菌效率低。
4. 介質(zhì)的性質(zhì)：制劑中含有營(yíng)養物質(zhì)，如糖類(lèi)、蛋白質(zhì)等，增強細菌的抗熱性。細菌的生存能力也受介質(zhì)PH值的影響。一般中性環(huán)境耐熱性**大，堿性次之，酸性不利于細菌發(fā)育。
1. 濕熱滅菌法的主要設備
濕熱滅菌法的主要設備是滅菌釜，滅菌釜種類(lèi)很多，性能差異也很大，但其基本結構大
同小異，所用的材質(zhì)為堅固的合金?，F在G內很多企業(yè)使用的方型高壓滅菌釜，能密閉耐壓，有排氣口、安全閥、壓力和溫度指示裝置。帶有夾套的滅菌柜備有帶軌道的格車(chē)，分為若干格。滅菌柜頂部裝有壓力表二只，一只指示蒸汽夾套內的壓力，另一只指示柜室內的壓力，兩壓力表中間為溫度計。滅菌柜的上方還應安裝排氣閥，以便開(kāi)始通入加熱蒸汽時(shí)排除不凝性氣體。近年來(lái)，一些制藥企業(yè)已經(jīng)開(kāi)始采用具有抽真空能力及F
0控制的蒸汽滅菌釜，目前G內使用的進(jìn)口滅菌釜主要有二種：一種以蒸汽為滅菌介質(zhì)的旋轉式滅菌釜，如奧地利的HDRR009．20／IS，另一種以過(guò)熱水作介質(zhì)的噴淋式滅菌釜，如意大利FEDEGARI公司的FOW5－500。進(jìn)口滅菌釜的主要優(yōu)點(diǎn)是批次量較大，溫度控制系統準確度及精密較好，產(chǎn)品滅菌過(guò)程中受熱比較均勻。
滅菌釜的基本滅菌程序為：
裝瓶 升溫、進(jìn)蒸汽置換空氣 滅菌 排汽 預熱水冷卻 卸壓
第三節 其他滅菌方法及消毒方法
一、輻射滅菌法
以放射性同位素，（
60C
O或
137C
S）放射的g 射線(xiàn)殺菌的方法。射線(xiàn)可使有機化合物的分子直接發(fā)生電離，產(chǎn)生破壞正常代射的自由基，導致微生物體內的大分子化合物分解。輻射滅菌的特點(diǎn)是不升高滅產(chǎn)品的溫度，穿透性強，適合于不耐熱藥物的滅菌，醫療器械、高分子材料、包裝材料等的滅菌。滅菌劑量一般用2.5×10
4GY（弋瑞）。此法已為《英G藥典》（1998），《日本藥局方》十三版所收載。我G有些企業(yè)亦用
60C
O對某些中藥和醫療器械進(jìn)行滅菌。輻射滅菌，設備費用高，對某此藥品可能產(chǎn)生藥效降低，產(chǎn)生毒性物質(zhì)或發(fā)熱物質(zhì)，使用輻射滅菌還應注意安全防護措施。
二、紫外線(xiàn)滅菌法
是指用紫外線(xiàn)照射殺滅微生物方法。一般用于滅菌的紫外線(xiàn)波長(cháng)是200~ 300nm，滅菌力**強的波長(cháng)是253.7nm。紫外線(xiàn)作用于核酸蛋白促使其變性，同時(shí)空氣受紫外線(xiàn)照射后產(chǎn)生微量臭氧，從而起共同殺菌作用。紫外線(xiàn)進(jìn)行直線(xiàn)傳播，可被不同的表面反射，穿透力微弱，但較易穿透清潔空氣及純凈的水。因此本法適用于照射物體表面之滅菌、無(wú)菌室的空氣及水的滅菌；不適用于藥液的滅菌、固體物質(zhì)深部的滅菌；普通玻璃可吸收紫外線(xiàn)，因此裝于玻璃容器中的藥物不能用此法滅菌。紫外線(xiàn)對人體照射過(guò)久，會(huì )發(fā)生結膜炎，紅斑及皮膚燒灼等現象，故一般在人入室前開(kāi)啟紫外線(xiàn)燈1~ 2小時(shí)，關(guān)閉后人才進(jìn)入潔凈室，如果必須在人進(jìn)去后仍要開(kāi)紫外線(xiàn)滅菌，則人的皮膚及眼睛應有有效的防護措施。
用紫外線(xiàn)照射滅時(shí)要注意下列問(wèn)題：
1．紫外線(xiàn)的殺菌力，隨使用時(shí)間增加而減退，一般使用時(shí)間達到額定時(shí)間70％時(shí)應更換紫外線(xiàn)燈管，以保證殺菌效果。G產(chǎn)紫外線(xiàn)燈平均壽命一般為2000h。
2．紫外線(xiàn)的殺菌作用隨菌種不同而不同，殺霉菌的照射量要比殺桿菌大40~ 50倍。
3．紫外線(xiàn)照射通常按相對濕度為60％的基礎設計，室內濕度增加時(shí)，照射量應相應增加。
4．紫外線(xiàn)滅菌效果與照射的時(shí)間長(cháng)短有關(guān)，這需要通過(guò)驗證來(lái)確定照射時(shí)間。
1. 紫外照射燈的安裝形式及高度，應根據實(shí)際情況，參考使用說(shuō)明決定。
三．環(huán)氧乙烷滅菌法
環(huán)氧乙烷滅菌法是利用環(huán)氧乙烷氣體進(jìn)行殺菌的方法。它是一種傳統的滅菌方法，可應用于工衣滅菌、不耐加熱滅菌的藥品、醫用器具、設施、設備等滅菌。環(huán)氧乙烷滅菌系統，主要有下列四項互相制約的重要因素影響滅菌效果：
1. 濕度；
2. 溫度；
3. 氣體濃度；
4. 滅菌時(shí)間。
因為環(huán)氧乙烷是易燃易爆物質(zhì)，明火可以引起燃燒，同時(shí)由于氣體分解不可能引起爆炸，環(huán)氧乙烷滅菌中應十分注意安全問(wèn)題。
環(huán)氧乙烷具有非常強的滲透和擴散能力，其滅菌的機理主要是強氧化，因此具有殺菌譜廣，滅菌能力強的特點(diǎn)，對微生物的繁殖體、芽孢有較強的殺滅效果。雖然環(huán)氧乙烷在高濃度時(shí)有刺激性臭味和毒性，但屬中度毒性，一般可以很快揮發(fā)，不會(huì )在系統內表面殘留余毒。#p#分頁(yè)標題#e#
用環(huán)氧乙烷氣體滅菌的程序,大致為將滅菌物品置于滅菌器內，減壓排除空氣，預熱，環(huán)氧乙烷氣體采用混合氣（一般環(huán)氧乙烷氣體含10~ 20％，二氧化碳含80~ 90％），在減壓下輸入混合氣體，保持一定濃度、溫度和濕度，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間后，抽真空排除環(huán)氧乙烷氣體，然后送入無(wú)菌空氣置換環(huán)氧乙烷氣體，直**排凈。
四、濾過(guò)滅菌法
濾過(guò)滅菌法是用濾過(guò)方法除去活的或死的微生物的方法，是一種機械除菌方法，這種機械叫除菌過(guò)濾器。主要用于對熱不穩定的藥物溶液、氣體、水的滅菌。供滅菌用的濾器，要求能有效地從溶液中除凈微生物，溶液順暢地由濾器通過(guò)，濾液中不落入任何不需要的物質(zhì)，濾器容易清洗，操作簡(jiǎn)便。
繁殖型細菌很少小于1m m的，芽胞大小為0.5m m或更小些。所以，對于以過(guò)篩作用濾過(guò)的濾器，例如纖維素酯膜濾器，其孔徑大小必須小到足以阻止細菌和芽孢進(jìn)入濾孔之內，孔徑約為0.2m m?？孔枇粲诳椎纼然蜢o電作用的濾器，孔徑可稍大于所要濾除的顆粒，但壓力過(guò)大或波動(dòng)，顆粒就有被擠過(guò)的可能。**常用測定孔徑的方法，是用大小為0.7m m左右的靈菌（B．prodigilsus）混懸液濾過(guò)，濾液通過(guò)培養實(shí)驗，觀(guān)察有無(wú)靈菌生長(cháng)。常用除菌濾器有微孔薄膜器，摺疊式纖維素濾棒，一般選用孔徑0.22m m。濾過(guò)法應配合無(wú)菌操作技術(shù)，并必須對成品進(jìn)行無(wú)菌檢查，以保證其除菌質(zhì)量。
5. 臭氧消毒法
臭氧（O
3）的消毒原理是：臭氧在常溫、常壓下分子結構不穩定，很快自行分解成氧（O
2）和單個(gè)氧原子（O），后者具有很強的活性，對細菌有極強的氧化作用,臭氧氧化分解了細菌內部氧化葡萄糖所必須的酶，從而破壞其細胞膜，將它殺死。多余的氧原子則會(huì )自行重新結合成為普遍氧分子（O
2），不存在任何有毒殘留物，故稱(chēng)為無(wú)污染消毒劑。它不但對各種細菌（包括肝炎病毒、大腸桿菌、綠膿桿菌及雜菌等）有極強的殺來(lái)滅能力，而且對霉菌也很有效。
生產(chǎn)臭氧的原料主要是電能和空氣，一般通過(guò)高頻臭氧發(fā)生器（電子消毒器）來(lái)獲得，消毒時(shí),直接將臭氧發(fā)生器直于房間中間即可。
臭氧消毒效果的驗證中需確誶和校正的臭氧發(fā)生器技術(shù)指標有：臭氧產(chǎn)量、臭氧濃度和時(shí)間定時(shí)器，并通過(guò)驗證檢查細菌數來(lái)確定消毒時(shí)間。
6. 甲醛消毒方法
1. 計算房間體積，按10g/m
3的比例秤出甲醛。
2. 將甲醛倒甲醛發(fā)生器或加熱盤(pán)或燒杯中，并放好加濕用水，必要時(shí)還可加入高錳酸
鉀（2~ 3g/m
3 ）,然后加熱（甲醛發(fā)生器用蒸汽加熱，加熱盤(pán)或燒杯可用熱水盛入其中加熱）使其蒸發(fā)成氣體。
3．滅菌流程：空調器停止運轉→啟動(dòng)甲醛氣體發(fā)生器或在加熱盤(pán)中熱甲醛→讓甲醛氣體擴散約30分鐘→啟動(dòng)空調器讓甲醛氣體循環(huán)約30分鐘→ 停止空調器，房間熏蒸消毒，時(shí)間不少于8小時(shí)→房間排氣，用新鮮空氣置換約2小時(shí)→恢復正常運行。
當相對溫度在65％以上，溫度在24－40℃時(shí)，甲醛氣體的消毒效果**好。
甲醛消毒滅菌的氣體發(fā)生量、熏蒸時(shí)間，換氣時(shí)間等應以驗證結果來(lái)**后確定。
5. 消毒劑消毒
潔凈室的墻面、天花板、門(mén)窗、機器設備、儀器、操作臺、車(chē)、桌、椅等表面以及人體雙手（手套）在環(huán)境驗證及日常生產(chǎn)時(shí)，應定期清潔并用消毒劑噴灑。常見(jiàn)的消毒劑有異丙醇（75％）、乙醇（75％）戊二（1％）、新潔而滅（0.1~ 0.2％）等。亦可用0.5~ 3%石碳酸或2~ 5％的甲苯酚。
無(wú)菌室用的消毒劑必須在層流工作臺中，用0.22μm的濾膜過(guò)濾后方能使用。
第四節滅菌管理要點(diǎn)
一、選用濾過(guò)器材和處理方法應符合工藝要求，微孔濾膜使用前后應作完整性試驗，以保證其滅菌效果。
二、藥液從配制到滅菌開(kāi)始，其間隔不得超過(guò)工藝規定的時(shí)間。
三、滅菌應有溫度、壓力及升溫時(shí)間、恒溫時(shí)間、數量及全過(guò)程的溫度壓力曲線(xiàn)圖或溫度曲線(xiàn)圖。
四、按批號進(jìn)行滅菌，不得混批。滅菌前后的中間產(chǎn)品應有可靠的防混措施。
五、滅菌設備使用前都必須進(jìn)行驗證，工藝改變或大修后，要進(jìn)行再驗證，以確保滅菌效果。
六、滅菌釜宜選擇雙扉式的滅菌釜，使用前應進(jìn)行溫度均勻性和滅菌效果的驗證，并有記錄，F
0值應控制在8.0以上。
七、直接接觸藥品的包裝材料、設備和其他物品的從滅菌到使用時(shí)間間隔應有規定。
5. 當一個(gè)批號產(chǎn)品使用多個(gè)滅菌柜滅菌時(shí)，應加亞批號。
6. 使用消毒劑消毒時(shí)，應有二個(gè)以上消毒劑輪換使用，以防止產(chǎn)生耐藥菌株。
第五節 蒸汽滅菌釜驗證
蒸汽滅菌驗證，一般的驗證步驟如下：
1. 驗證方案的制訂；
2. 驗證方案的批準；
3. 儀表及文件的準備；
4. 預確認；
5. 安裝確認―――電氣安裝、蒸汽安裝、冷卻水安裝；
6. 運行確認―――單機或系統試車(chē)；
7. 性能確認―――熱分布測試、熱穿透性試驗、生物指示劑驗證試驗、微生物孢子的挑戰性試驗；
8. 驗證報告―――數據分析、驗證結果、評價(jià)和建議；
9. 批準結論。
蒸汽滅菌釜驗證如何進(jìn)行，原G家醫藥管理局推行GMP、GSP委員會(huì )編的《藥品生產(chǎn)驗證指南》（1996年4月出版）P263附錄四“滅菌釜驗證示例”可作參考。#p#分頁(yè)標題#e#
