1.0目標
用生物指示劑驗證高壓
滅菌器的滅菌效率。
2.0范圍
該程序適用于安裝在質(zhì)量控制實(shí)驗室微生物區域內的高壓
滅菌器。
3.0責任
3.1工作：技術(shù)助理（微生物學(xué)家）/行政人員
3.2檢查：行政人員/經(jīng)理
4.0問(wèn)責制
系主任
5.0程序
5.1頻率：一年兩次
5.2有機體：嗜熱芽孢桿菌芽孢。（認證強度10 6）
5.3對批次/批次中用于驗證目的的一條條狀嗜熱芽孢桿菌孢子進(jìn)行初步計數。
5.4孢子的初始計數：
5.4.1將試紙條無(wú)菌轉移至100 ml無(wú)菌生理鹽水中，保持1/2小時(shí)并進(jìn)行熱震，將試管在70°C-80°C的水浴中放置15分鐘。
5.4.2用手掌搖動(dòng)或渦旋震蕩試管以使孢子懸浮液均勻化
5.4.3根據初始計數，在無(wú)菌生理鹽水中進(jìn)一步稀釋
5.4.4以不同的稀釋度一式兩份取每個(gè)等分試樣，使菌落計數不超過(guò)300 cfu /板。
5.4.5將已融化并冷卻至45°C至50°C的SCD瓊脂培養基倒入分配的板中，使其渦旋并使其固化。
5.4.6將平板
倒置放置在55±2°C下孵育48-72小時(shí)。
5.4.7計算每個(gè)板的菌落數，并使用稀釋倍數計算平均數/條。
5.4.8如果初始計數不超過(guò)標簽聲明的150％且不小于標簽聲明的75％，則將試紙條用于驗證目的。
5.4.9在A(yíng)nnexure-I中記錄結果
5.5高壓
滅菌器驗證
5.5.1在
高壓滅菌器腔室中裝入配件和玻璃器皿。
5.5.2服用要求沒(méi)有。條狀標簽，貼上標簽并按如下所述放入
高壓滅菌鍋內。
5.5.3將試條放在培養皿中，分別按照雙門(mén)和豎式
高壓滅菌器附件III和IV中給出的位置圖將其放置在
高壓滅菌器中。
5.5.4保持一條未暴露的帶正控制。
5.5.5按照SOP（對于立式
高壓滅菌鍋）和SOP（對于雙門(mén)
高壓滅菌鍋），在121°C和15磅壓力下運行高壓
滅菌鍋循環(huán)20分鐘。
5.5.6循環(huán)結束后，取出所有試紙。
5.5.7在無(wú)菌SCD（大豆酪蛋白消化）培養基試管（10毫升）上標記位置，日期和設備ID號。將試紙條無(wú)菌轉移到相應的標記SCD培養基試管中。
5.5.8將一根未曝光的膠條轉移到SCD介質(zhì)管中，并將其標記為“陽(yáng)性對照”。
5.5.9保持一根未接種的SCD培養基管進(jìn)行陰性控制。
5.5.10將所有試管在55°C±2°C下孵育14天。
5.5.11每天觀(guān)察試管，直到有條帶的SCD中試管，直到14天為止渾濁/生長(cháng)。
5.5.12正面控制應在72小時(shí)內顯示出生長(cháng)。
5.6解釋
5.6.1如果在任何SCD培養基試管中均未觀(guān)察到生長(cháng)，則表明設備性能令人滿(mǎn)意。
5.6.2如果在任一SCD培養基試管中觀(guān)察到生長(cháng)，請鑒定進(jìn)行革蘭氏染色的嗜熱脂肪芽孢桿菌的生長(cháng)，同時(shí)將其與陽(yáng)性對照進(jìn)行比較。萬(wàn)一發(fā)生故障，請檢查是否違反驗證規定，并停止使用設備。同時(shí)，糾正原因并執行重新驗證。符合規定后，設備可用于常規用途。并重復循環(huán)。
5.6.3維護確認記錄并粘貼符合以下條件的校準卡。
設備名稱(chēng)：
身份證號碼：
驗證頻率：
驗證
日期：驗證的截止日期：
驗證者：
5.7將結果記錄在A(yíng)nnexure-II中附上滅菌周期記錄圖和報告。
6.0縮寫(xiě)
SCD =
大豆酪蛋白消化N.鹽水=生理鹽水
小時(shí)=小時(shí)
cfu =菌落形成單位
B. =芽孢桿菌
ml =毫升
％=百分比
° C =攝氏度
USP =美G藥典
＆=和
SOP =標準操作程序
